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lipo3000全新的转染试剂
浏览次数:15330发布日期:2015-09-10

lipo3000全新的转染试剂

能转染难处理细胞的通用型试剂:

  • zui高的效率—适用于各种难以转染的以及常见的细胞类型
  • 温和低毒—细胞活性更高
  • 功能多样—适用于DNA、RNA和共转染的试剂盒

在难转染细胞类型中具有广泛的优良性能

Lipofectamine? 3000试剂充分利用了我们先进的脂质体纳米颗粒技术,实现了超高转染性能和可重复的试验结果。其可在zui广泛的难转染和通用细胞类型(图1)中获得非凡的转染效率,同时提升细胞存活率。



图1. Lipofectamine? 3000试剂胜过了Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD试剂。每一种试剂均用于以96孔形式转染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549细胞系,并在转染后48小时分析GFP表达情况。在所有五种细胞系中,Lipofectamine? 3000都表现出了高于Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD的GFP转染效率。



图2. Lipofectamine? 3000操作手册在保持易用性的同时,还保持了优异的性能和可靠性,适用于广泛的细胞系类型。

下载Lipofectamine? 3000操作手册 >

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温和低毒

在开发Lipofectamine? 3000时,我们对转染过程的四个步骤进行了优化,同时结合了我们先进的脂质体纳米颗粒技术。其所具有的超高转染效率使得我们可以减少试剂剂量,降低处理细胞时的潜在毒性风险。


图3. 采用剂量的每种试剂,通过绿色荧光蛋白(GFP)表达载体,以96孔形式转染HeLa细胞。在转染后48小时,采用流式细胞仪进行分析,以测定百分比形式的转染效率以及GFP表达强度。相对于Lipofectamine? 2000试剂和Lipofectamine? LTX试剂,Lipofectamine? 3000试剂表现出了更高的转染效率和蛋白表达水平。

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增强您的癌症研究工作

使用生物相关性的细胞系,可为您的研究课题提供相关性的答案。Lipofectamine? 3000试剂适用于zui广泛的细胞谱系且兼具较高的转染效率,使您可以非常灵活地在研究中应用自己选择的细胞。

表1. 在不同的细胞系中,Lipofectamine? 3000试剂获得了比Lipofectamine? 2000试剂更高的转染效率。

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  • 细胞系 #-C
  • 细胞系 D-J
  • 细胞系 K-P
  • 细胞系 R-Z
细胞类型Lipofectamine? 3000试剂转染效率Lipofectamine? 3000相对于 Lipofectamine? 2000试剂蛋白表达水平提高倍数
3T34
4T12
A4312
A5493
ACHN2
bEnd.39
BJ3
BT-5494
C2C123
C65
Caco-22
Caki-14
CHO-K11
CHO-S1
COLO 2054
COS-74

转染效率 (%): <30%     30-50%    51-79%    >80% 

Lipofectamine? 3000试剂与的Lipofectamine? 2000试剂相比,在多种组织来源的癌症细胞中具有更高的转染效率。在所选的癌症细胞系中,使用Lipofectamine? 2000仅有25%被认为易于转染(>50%的转染效率),而使用Lipofectamine? 3000却有60%的细胞系是易于转染的。



图4. 采用Lipofectamine? 2000试剂和Lipofectamine? 3000试剂将表达GFP的质粒转染至17种癌症细胞系中,利用各试剂推荐的实验方案,在24孔板中进行转染,每孔质粒用量为0.5μg。转染48小时后分析GFP表达情况。重复检测3次,数据点显示平均转染效率 + 标准差。

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生成诱导多能干细胞(iPSCs)

Lipofectamine? 3000优异的转染效率配合Epi5? Episomal iPSC Reprogramming Kit保证了体细胞的重编程,无需电转。

图5. 结果来自于明场显微镜,(A) Lipofectamine? 3000和 (B) Neon? 转染系统都表明在生成iPSC细胞群落时重编程成功了。使用碱性磷酸酶进行末端染色。

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改善基因组编辑结果

开发Lipofectamine? 3000试剂,旨在突破输送技术的界限,促进生物相关系统内的新技术发展,例如基因组编辑。通过这一新试剂,GeneArt? TALs 和 CRISPR 可以靶向HepG2和U2OS细胞内的AAVS1位点,同时表现出更佳的转染效率、平均荧光强度和基因组切割效果。这些改进之处有助于zui大限度减少繁重的下游工作,更便于进行干细胞处理,增强转基因在细胞基因组中的位点特异性插入。

下载应用说明 >



图6. GeneArt? TALs 和 CRISPRs的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2细胞系中的AAVS1位点。采用GeneArt?基因组切割检测试剂盒分析切割效率。



图7. 使用CRISPR载体时的转染效率和蛋白表达。该载体含有OFP报告基因,并采用Lipofectamine? 2000或Lipofectamine? 3000转染试剂转染到(A) U2OS和(B) HepG2细胞系中。柱状图所示为报告基因的表达。图片所示为相应细胞表达OFP的荧光图。

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转染干细胞

图8. 使用Lipofectamine ? 3000转染H9干细胞 (A)或iPSC (B)。

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*不必购买。此次*面向中国大陆境内年满21岁的生命科学专业人士。样品申请必须于2014年6月30日之前或者样品发放完毕之前提交给我们,以二者之中的较早者为准。样品规格为0.1 mL。每名顾客限领一份。医护专业人士不得参与此次*活动。本次*不享受其它折扣或*。如遇法律或法规,或公司/机构政策禁止、许可或限制,本次活动作废。可能会适用其他未注明的限制条件。

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资源

  • 应用说明:
    改善基因组编辑结果[PDF, 3 MB]
    Lipofectamine? 3000 iPSCs的生成和转染[PDF,6MB]
  • 海报:
    Lipofectamine? 3000 海报 [PDF, 370 KB]