化学发光分析技术是现代微量分析方法之一，由于其灵敏度高(可达10-18mol)、简便快速(计数1秒/管)、线性好(可两点校准标准曲线)、有效期长(可达1年)、安全无害(无放射性和致畸物污染)等优点而成为取代放免和酶联的重要技术。

　　

　　辣根过氧化酶使试剂中的发光物（luminol）氧化并发光，而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中，将复杂的蛋白混合物经sds-page分离，并转移到固相膜上（如nc、pvdf）等，用于免疫学检测，经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接（标记一抗）或间接（标记二抗）反应。

　　

　　在如今的Westernblot实验中，化学发光检测是常用的检测方法。相对于显色检测和荧光检测而言，它的灵敏度非常高，可达到飞克级（fg）。自从增强型化学发光（ECL）检测问世以来，这种方法就受到了*科研工作者的喜爱。

　　

　　化学发光检测通常使用的是辣根过氧化物酶（HRP）。它催化底物鲁米诺（luminol）的氧化，同时生成光信号。这些信号可通过X光胶片的曝光来检测，或直接在与化学发光兼容的CCD成像系统上获取图像。当然，后一种方式更方便，也更流行。

　　

　　用途：

　　

　　该底物试剂与碱性磷酸酶（ALP）混合后，碱性磷酸酶磷酸根水解后，底物立即发生分解反应释放出光子，在特定的碱性磷酸酶浓度范围内，释放的光子数量与溶液中碱性磷酸酶的浓度成正比，所以可以用于碱性磷酸酶的定量检测。

　　

　　应用领域：

　　

　　1碱性磷酸酶发光检测；

　　

　　2.ELISA化学发光检测；

　　

　　3.WB化学发光检测；

　　

　　4.其他酶联化学发光反应检测。