您好,欢迎进入上海力敏实业有限公司网站!
一键分享网站到:
您现在的位置:首页 >> 产品中心 >> 生化试剂、抗体、血清 >> 常规生化试剂 >> 17-0891-01GE Percoll细胞分离液17-0891-01

GE Percoll细胞分离液17-0891-01

  • 更新时间:  2015-11-16
  • 产品型号:  17-0891-01
  • 简单描述
  • GE Percoll细胞分离液17-0891-01
    Percoll为低粘度的密度梯度介质,用于分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子。粘度低,因此使用低的离心力(200-1000× g),只需几分钟就可形成梯度对细胞进行分离。Percoll供货时已经消毒,并且易于再次消毒。包装于易打开,并可再次密封的250ml和1升瓶中。
详细介绍

GE Percoll细胞分离液17-0891-01

1、在温和的条件下,分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子(可小至~70S),保持其存活和形态的完整性

2、对细胞无毒性

3、可调整到生理状态下的离子强度和pH

4、使用角转头,以中速离心,即可形成梯度

5、等渗梯度,密度zui大可达到1.3 g/ml。

GE Percoll细胞分离液17-0891-01

操作方法及注意事项
  1.不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
 Percoll浓度(%)  70    60    50    40    30     20
  比重g/ml    1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
2.不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层Percoll比重相差不大时,可将Percoll液放入注射器中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。
3.装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。
4.离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层Percoll之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
5.取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。


分离纯化细胞举例
  1.富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五种不同密度的Percoll,如用10ml试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2~1.5ml,初步从外周血中分离的PBMC细胞1×108悬于1ml培基中,按要求装样、离心和取样。一般富含NK杀伤活性的LGL细胞位于42.5%与45%Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
2.纯化淋巴母细胞和除去死细胞:分别叠加50%和30%Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者),按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞;两层Percoll之间为淋巴母细胞,纯度和回收率在80%以上,位于30%Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。



留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
    QQ在线客服
  • 点击这里给我发消息
  • 点击这里给我发消息
电话
021-54631172
手机
15801836589
微信扫一扫
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站