QIAamp RNA Blood Mini Kit全血RNA分离纯化试剂盒
QIAamp RNA Blood Mini Kit全血RNA分离纯化试剂盒
从新鲜的全血样本中纯化胞内RNA
QIAamp RNA Blood Mini Kit全血RNA分离纯化试剂盒
订购信息:
Cat No./ID: 52304
QIAamp RNA Blood Mini Kit (50)
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For 50 RNA preps: 50 QIAamp Mini Spin Columns, 50 QIAshredder Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free reagents and buffers
可靠的RT-PCR分析。
血液中的总RNA的RT-PCR。使用QIAamp RNA Blood Mini Kit从50 µl健康的人全血(含有抗凝剂)中纯化总RNA,使用50 µl不含RNA酶的水洗脱。对于每个样本,使用5 µl或15 µl洗脱液或对照(15 µl洗脱液,未进行RT)进行三次RT-PCR反应(从左至右)。进行RT-PCR时,使用不含RNA酶的DNA酶酶切样本并使用oligo-dT引物进行逆转录。使用GAPDH引物扩增1/10(2.5 µl)的cDNA。每个泳道上样1/5的PCR反应产物。–:按上述步骤进行PCR,但以蒸馏水代替洗脱液;+:阳性对照cDNA片段。M:100 bp DNA分子量标准。
Performance
QIAamp纯化流程可*去除RNases、污染物和酶抑制剂,制备的高品质RNA适用于多种下游应用(参见"High-quality RNA for northern analysis"和"Reliable RT-PCR analysis")。
QIAamp RNA Blood Mini Kit制备的RNA品质高,含有zui少量的DNA。RNA的纯化不可避免存在DNA污染。但对于某些痕量DNA敏感的RNA应用则必须去除残留的DNA,对于这些应用,QIAGEN RNase-Free DNase Set(可选购)为QIAamp RNA纯化流程提供简便的柱上DNase酶处理操作,去除残留DNA。
Principle
QIAamp RNA Blood Mini Kit使用硅胶膜技术纯化细胞RNA,无需苯酚-氯fang抽提。RNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流出。通过两步高效洗涤*去除二价阳离子和蛋白质等PCR抑制剂,再用水或试剂盒中的缓冲液洗脱结合在离心柱上的纯DNA。
QIAamp技术从新鲜的全血样本或其他样本来源中纯化的总细胞RNA,可即时用于PCR和印迹实验中。QIAamp样本制备技术*得到验证认可。
Procedure
QIAamp RNA Blood Mini Kit使用快速离心操作简化从血液中纯化RNA的操作流程(参见"Procedure")。选择性裂解红细胞,离心收集白细胞。在高度变性条件下白细胞裂解,RNases很快失活。使用QIAshredder离心柱均质化后,将样本上样到QIAamp离心柱。总RNA结合到QIAamp膜,污染物流出,在30–100 µl的无RNase水中洗脱残留的纯RNA(试剂盒提供),可即时用于多种下游应用。
Applications
QIAamp RNA Blood Mini Kit可从多至1.5 ml的新鲜人体全血中纯化细胞RNA。可以使用常规的抗凝剂如柠檬酸盐、肝素或EDTA等稳定血液样本。也可从组织样本中纯化得到总细胞RNA。